高效好氧反硝化耐冷菌的分离鉴定及其冷适应分子机理研究.pdf

节选段落一：
因此本研究以低温富氮水体为修复对象，分离鉴定高效的好氧反硝化耐冷
菌，并利用荧光定量 PCR微阵列筛选菌株抗寒的关键冷休克蛋白基因和克隆好氧反硝化关键
酶基因及对其结构进行预测，从分子水平揭示菌株的抗寒和低温好氧反硝化的生化机制和遗
传特征；同时研究耐冷菌好氧反硝化的限制性因子和主要环境因子之间的联合作用机制，为
高效基因工程菌的构建和从基因水平对好氧反硝化耐冷菌的微生态调控提供理论依据和技
术支持。


节选段落二：
（3）菌株低温好氧反硝化的冷适应分子机理研究
① 耐冷好氧反硝化菌株冷休克蛋白作用机制的系统学研究
荧光定量 PCR 微阵列（qPCR Array）检测低温条件下所有冷休克蛋白家族基因在耐冷好氧反硝
化菌株中的表达差异，依据低温条件对冷休克蛋白家族进行行为聚类，筛选出该菌的冷适应关键基
因。并采用质粒转化和基因敲除的基因工程菌进一步研究该关键基因编码的冷休克蛋白的功能和特
性。


节选段落三：
（1）分离鉴定出高效好氧反硝化耐冷菌，揭示好氧反硝化的限制性因子和主要因子之间的联合
作用机制。
（2）对耐冷好氧反硝化菌冷休克蛋白基因的作用机制进行全面的系统学研究，筛选好氧反硝化
菌株抗寒的关键冷休克蛋白基因。
（3）克隆低温好氧反硝化酶基因并进行功能分析，从基因水平阐述功能酶低温催化的分子机理。
5.年度研究计划及预期研究结果。（包括拟组织的重要学术交流活动、
国际合作与交流计划等）
年度研究计划
2012
采集低温菌源样品进行耐冷好氧反硝化细菌的驯化富集、生理生化实验和 16S rDNA 序列测定与
分析。分析不同菌株的反硝化能力，确定高效菌株。